Chymotrypsin Alpha CDI

La Chymotrypsin, Alpha, 3X (Code: CDI) est une alpha-chymotrypsine dérivée du pancréas bovin (EC 3.4.21.1). Il s’agit d’une sérine endopeptidase catalysant préférentiellement l’hydrolyse des liaisons peptidiques impliquant les résidus L-tyrosine, L-phénylalanine et L-tryptophane. L’enzyme agit également sur les amides et esters d’acides aminés sensibles et peut hydrolyser des liaisons impliquant des résidus leucyl, méthionyl, asparaginyl et glutamyl. La préparation CDI correspond à une alpha-chymotrypsine trois fois cristallisée, obtenue par activation d’un zymogène trois fois cristallisé. Après activation, le produit est dialysé contre HCl 1 mM afin d’éliminer les produits d’autolyse et contaminants de faible poids moléculaire, puis lyophilisé. Cette procédure assure une préparation adaptée aux travaux de biochimie structurale et fonctionnelle des protéines. L’unité enzymatique est définie comme la quantité d’enzyme hydrolysant une micromole de benzoyl-L-tyrosine éthyl ester par minute à 25°C, pH 7,8, en présence de calcium. Une activité de 45 unités par mg selon cette définition correspond à 10 000 unités de densité optique ou 1 330 unités N.F. par mg avec l’ATEE comme substrat ; 1 unité BTEE équivaut à 29,5 unités USP/NF. L’enzyme est stable plusieurs jours en solution à pH 3,0 et stable pendant des années sous forme sèche à 2–8°C. Il est recommandé de protéger la poudre de l’humidité pendant le stockage.