Deoxyribonuclease I DPRFS

La Deoxyribonuclease I DPRFS est une désoxyribonucléase I d’origine pancréatique bovine (EC 3.1.21.1), classée comme endonucléase. Elle catalyse l’hydrolyse des liaisons phosphodiester de l’ADN, préférentiellement adjacentes à un nucléotide pyrimidique. L’activité enzymatique génère des polynucléotides possédant un groupement hydroxyle libre en position 3’ et un groupement phosphate en position 5’. La digestion limite conduit en moyenne à des fragments de type tétranucléotide. Les codes produits DPRF et DPRFS sont spécifiquement conçus pour des applications de biologie moléculaire et présentent les niveaux les plus faibles d’activités RNase et protéase parmi les préparations proposées. Ces caractéristiques permettent l’utilisation de l’enzyme dans des protocoles exigeant la digestion sélective de l’ADN lors de la récupération d’ARN intact ou dans des contextes où l’intégrité de protéines structurales ou enzymatiques doit être maintenue. Les applications incluent notamment la nick translation, la cartographie de l’ADN, l’isolement d’ARN nucléaire et de protéines, la synthèse de sondes ARN par ARN polymérase ainsi que la RT-PCR. En culture cellulaire, la DNase I est également utilisée pour réduire la viscosité des suspensions en digérant l’ADN libéré par des cellules endommagées et pour éliminer des fragments d’ADN liés aux membranes. L’unité d’activité est définie comme la quantité d’enzyme provoquant une augmentation d’absorbance à 260 nm de 0,001 par minute et par millilitre à 25 °C, en agissant sur de l’ADN hautement polymérisé à pH 5,0. La stabilité des différentes qualités de DNase Worthington est de 2 à 3 ans lorsqu’elles sont stockées dans les conditions recommandées. Le code produit DPRFS peut être conservé à -20 °C.