Deoxyribonuclease I DSV

La Deoxyribonuclease I (DNase I) est une endonucléase isolée du pancréas bovin. Elle catalyse l’hydrolyse des liaisons phosphodiester de l’ADN, préférentiellement adjacentes aux nucléotides pyrimidiques. L’enzyme produit des fragments polynucléotidiques présentant un groupement hydroxyle libre en position 3’ et un groupement phosphate en position 5’. Le produit d’un digest limite correspond en moyenne à un tétranucléotide. La DNase I est utilisée dans de nombreuses applications de biologie moléculaire nécessitant une digestion sélective de l’ADN, notamment lors de la récupération d’ARN intact, dans les procédures de nick translation, de cartographie de l’ADN, d’isolement d’ARN nucléaire ou de protéines, ainsi que dans la synthèse de sondes ARN et certaines approches de RT-PCR. En culture cellulaire et lors de dissociation tissulaire, elle permet de dégrader l’ADN libéré par les cellules endommagées, réduisant ainsi la viscosité des suspensions cellulaires et facilitant les étapes de manipulation et de purification. Lorsqu’elle est conservée selon les conditions recommandées par le fabricant, la DNase I présente une stabilité de 2 à 3 ans. Des recommandations spécifiques existent pour la conservation en solution, incluant l’utilisation de tampons adaptés, la présence d’ions calcium et le stockage en aliquots à basse température afin de préserver l’activité enzymatique.